1. Kas ir šūnu kultūra?
Šūnu kultūra attiecas uz šūnu izņemšanu no dzīvniekiem vai augiem un pēc tam to audzēšanu labvēlīgā mākslīgā vidē.Šūnas var ņemt tieši no audiem un sadalīt ar fermentatīviem vai mehāniskiem līdzekļiem pirms kultivēšanas, vai arī tās var iegūt no noteiktām šūnu līnijām vai šūnu līnijām.
2. Kas ir primārā kultūra?
Primārā kultūra attiecas uz kultivēšanas stadiju pēc tam, kad šūnas ir atdalītas no audiem un vairojas atbilstošos apstākļos, līdz tās aizņem visus pieejamos substrātus (tas ir, sasniedz saplūšanu).Šajā posmā šūnas ir jākultivē, pārnesot tās uz jaunu konteineru ar svaigu augšanas barotni, lai nodrošinātu vairāk vietas turpmākai augšanai.
2.1 Šūnu līnija
Pēc pirmās subkultūras primāro kultūru sauc par šūnu līniju vai subklonu.Šūnu līnijām, kas iegūtas no primārajām kultūrām, ir ierobežots mūža ilgums (ti, tās ir ierobežotas; skatīt zemāk), un, tām ejot, dominē šūnas ar vislielāko augšanas spēju, kā rezultātā populācijā veidojas noteikta genotipa pakāpe, kas atbilst fenotipam.
2.2. Šūnu celms
Ja ar klonēšanu vai kādu citu metodi no kultūras tiek pozitīvi atlasīta šūnu līnijas apakšpopulācija, šūnu līnija kļūtu par šūnu celmu.Šūnu celmi parasti iegūst papildu ģenētiskas izmaiņas pēc vecāku līnijas sākuma.
3.Ierobežotas un nepārtrauktas šūnu līnijas
Normālas šūnas parasti sadalās tikai ierobežotu skaitu reižu, pirms tās zaudē spēju vairoties.Tas ir ģenētiski noteikts notikums, ko sauc par novecošanos;šīs šūnu līnijas sauc par ierobežotām šūnu līnijām.Tomēr dažas šūnu līnijas kļūst nemirstīgas, izmantojot procesu, ko sauc par transformāciju, kas var notikt spontāni vai ko var izraisīt ķīmiskas vielas vai vīrusi.Kad ierobežota šūnu līnija tiek pārveidota un iegūst spēju bezgalīgi dalīties, tā kļūst par nepārtrauktu šūnu līniju.
4.Kultūras stāvoklis
Katra šūnu tipa kultivēšanas apstākļi ir ļoti atšķirīgi, taču mākslīgo vidi šūnu kultivēšanai vienmēr veido piemērots konteiners, kurā ir:
4.1. Substrāts vai barotne, kas nodrošina būtiskas uzturvielas (aminoskābes, ogļhidrātus, vitamīnus, minerālvielas)
4.2. Izaugsmes faktori
4.3. Hormoni
4.4 Gāzes (O2, CO2)
4.5 Regulēta fizikālā un ķīmiskā vide (pH, osmotiskais spiediens, temperatūra)
Lielākā daļa šūnu ir atkarīgas no stiprinājuma, un tās jākultivē uz cieta vai daļēji cieta substrāta (pielipusi vai vienslāņa kultūra), savukārt citas šūnas var augt, peldot barotnē (suspensijas kultūra).
5.Kriokonservēšana
Ja subkultūrā ir šūnu pārpalikums, tās jāapstrādā ar atbilstošu aizsarglīdzekli (piemēram, DMSO vai glicerīnu) un jāuzglabā temperatūrā, kas zemāka par -130°C (kriokonservācija), līdz tās ir vajadzīgas.Plašāka informācija par subkultūru un šūnu krioprezervāciju.
6. Šūnu morfoloģija kultūrā
Šūnas kultūrā var iedalīt trīs pamatkategorijās, pamatojoties uz to formu un izskatu (ti, morfoloģiju).
6.1. Fibroblastu šūnas ir bipolāras vai daudzpolāras, tām ir iegarena forma un tās aug piestiprinātas pie substrāta.
6.2. Epitēlijam līdzīgas šūnas ir daudzstūrainas, tām ir regulārāks izmērs, un tās ir pievienotas matricai atsevišķās loksnēs.
6.3. Limfoblastiem līdzīgās šūnas ir sfēriskas un parasti aug suspensijā, nepiestiprinoties virsmai.
7.Šūnu kultūras pielietošana
Šūnu kultūra ir viens no galvenajiem instrumentiem, ko izmanto šūnu un molekulārajā bioloģijā.Tā nodrošina lielisku paraugu sistēmu šūnu normālas fizioloģijas un bioķīmijas (piemēram, vielmaiņas pētījumi, novecošanās), zāļu un toksisko savienojumu ietekmes uz šūnām, kā arī mutaģenēzes un kancerogēno efektu izpētei.To izmanto arī zāļu skrīningam un izstrādei un bioloģisko savienojumu (piemēram, vakcīnu, terapeitisko proteīnu) liela mēroga ražošanai.Galvenā priekšrocība, izmantojot šūnu kultūru jebkurā no šiem lietojumiem, ir to rezultātu konsekvence un reproducējamība, ko var iegūt, izmantojot klonētu šūnu partiju.
Publicēšanas laiks: 03.03.2019